王晓立 , 魏辉 , 武小龙 , 张嘉鑫 , 诸葛强^*

南京林业大学生物与环境学院, 南方现代林业协同创新中心, 林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室, 南京, 210037
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《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 12 篇   
收稿日期: 2019年07月23日    接受日期: 2019年07月31日    发表日期: 2020年08月23日

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膜联蛋白(Annexin)是一类 Ca²⁺ 及磷脂结合蛋白，在非生物逆境胁迫方面发挥重要作用，但木本模式植物杨树膜联蛋白基因的研究还未见报道。本研究通过 RT-PCR 与 RACE 相结合的方法从毛果杨(Populus trichocarpa)克隆获得膜联蛋白 3 (Ptann3)基因 cDNA 序列，分析发现编码蛋白质 Ptann3 与其他植物膜联蛋白高度同源，具有过氧化物酶活性结构域、S3 氧化还原反应结构域、GTP 结合结构域及钙结合位点。构建原核表达载体 pET-28a-Ptann3，转入大肠杆菌 BL21 (DE3)中表达分析，Ptann3 蛋白分子量 35.6 kD，分析表明 Ptann3 蛋白具有过氧化物酶与 ATPase 活性。qPCR 分析结果显示，Ptann3 基因在根、上部茎、下部茎、叶柄、幼叶和成叶中均有表达，在幼叶中表达量最高，在叶柄和根中表达量次之，成叶和茎中表达量最低。此外，研究发现低温、ABA、PEG6000、H₂O₂ 和 NaCl 胁迫处理可显著影响 Ptann3 基因的表达，推测杨树 Ptann3基因在非生物逆境胁迫中发挥重要作用，研究结果对杨树抗逆遗传改良具有重要意义。
 

杨树(Populus)；膜联蛋白 3；表达特性；非生物胁迫；基因克隆